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阿爾茨海默?。ˋD）作為亟待攻克的神經(jīng)退行性疾病，其核心病理特征是 β- 淀粉樣蛋白（Aβ）在腦內(nèi)異常沉積，而血腦屏障（BBB）功能障礙是導(dǎo)致 Aβ 清除受阻的關(guān)鍵誘因。近期，四川大學(xué)華西醫(yī)院協(xié)同國際團(tuán)隊在《Signal Transduction and Targeted Therapy》（IF= 52.7）發(fā)表的重磅研究，提出了一種全新的納米治療策略 —— 通過 A??-POs 納米載體調(diào)控 BBB 上 LRP1 受體的運輸通路，實現(xiàn) Aβ 的快速清除與認(rèn)知功能的長期恢復(fù)。
01. 研究三大突破
該研究實現(xiàn)了三大關(guān)鍵突破：2 小時內(nèi)清除 AD 模型小鼠腦內(nèi)近 45% 的 Aβ、修復(fù) BBB 運輸功能、認(rèn)知改善效果持續(xù) 6 個月。而這一系列突破性結(jié)論的背后，離不開精準(zhǔn)可靠的實驗技術(shù)支撐 —— ProteinSimple Jess 自動化數(shù)字 Western blot 系統(tǒng)，其在腦部分離組分純度驗證中的核心應(yīng)用（Figure S12），為研究機制的嚴(yán)謹(jǐn)性提供了關(guān)鍵數(shù)據(jù)保障。
02. 核心技術(shù)支撐：Jess 系統(tǒng)在實驗中的關(guān)鍵應(yīng)用
在 AD 病理機制研究中，腦內(nèi)血管與實質(zhì)組織的精準(zhǔn)分離是解析 BBB 運輸功能的前提。研究團(tuán)隊采用葡聚糖密度梯度法分離小鼠腦組織的血管組分與實質(zhì)組分后，需通過特異性標(biāo)志物驗證分離純度，以確保后續(xù) Aβ 運輸、受體表達(dá)等實驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性 —— 這一關(guān)鍵驗證步驟正是通過 Jess 系統(tǒng)完成。
03. 數(shù)據(jù)解讀：分離組分純度的精準(zhǔn)驗證
(1) 實驗設(shè)計：
針對分離后的腦血管組分與實質(zhì)組分，分別檢測內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)志物（CD31）、周細(xì)胞標(biāo)志物（CD146）和神經(jīng)元標(biāo)志物（NeuN）的表達(dá)水平。
(2) Jess 系統(tǒng)檢測結(jié)果：
• 血管組分中，CD31 和 CD146 的條帶信號強、灰度值峰面積顯著高于實質(zhì)組分，表明血管組織分離完整；
• 實質(zhì)組分中，神經(jīng)元標(biāo)志物 NeuN 的信號占優(yōu)，而血管標(biāo)志物信號微弱，證明分離過程未發(fā)生明顯交叉污染；
• 條帶圖像清晰無拖尾，灰度值定量數(shù)據(jù)重復(fù)性好（n≥3），為后續(xù) LRP1、PACSIN2 等蛋白的精準(zhǔn)定量奠定基礎(chǔ)。
04. Jess 系統(tǒng)的技術(shù)優(yōu)勢：為何成為該研究的優(yōu)選工具？
(1) 自動化操作，避免人為誤差
傳統(tǒng) Western blot 需手動完成制膠、電泳、轉(zhuǎn)膜、孵育等多步操作，而 Jess 系統(tǒng)實現(xiàn)全流程自動化，減少實驗人員操作差異，確保數(shù)據(jù)穩(wěn)定性 —— 這對于腦部分離這類樣本量少、處理復(fù)雜的實驗至關(guān)重要。
(2) 微量樣本檢測，適配珍貴組織
AD 模型小鼠腦組織稀缺，分離后的血管 / 實質(zhì)組分樣本量極微。Jess 系統(tǒng)僅需 3μL 樣本即可完成檢測，遠(yuǎn)低于傳統(tǒng) Western 的樣本需求量，盡可能利用珍貴實驗材料。
(3) 精準(zhǔn)定量，超越定性分析
通過 Compass for Simple Western 軟件實現(xiàn)灰度值峰面積的精準(zhǔn)計算，提供定量數(shù)據(jù)而非傳統(tǒng) Western 的定性 / 半定量結(jié)果，滿足研究中 “組分純度量化驗證" 的嚴(yán)格要求。
(4) 高分辨率分離，標(biāo)志物區(qū)分清晰
采用 12-230 kDa 分離模塊，成功區(qū)分 CD31（~135 kDa）、CD146（~75 kDa）、NeuN（~50 kDa）等不同分子量的標(biāo)志物，條帶分辨率高、無重疊干擾。
05. 總結(jié)與展望
ProteinSimple Jess 自動化數(shù)字 Western blot 系統(tǒng)以其 “微量樣本適配、自動化操作、精準(zhǔn)定量" 的技術(shù)優(yōu)勢，成為該 AD 突破性研究中重要的技術(shù)支撐，其在本研究中完成的腦部分離組分純度驗證，為整個研究的機制解析提供了可靠的數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。
在神經(jīng)退行性疾病研究中，樣本稀缺、機制復(fù)雜、定量要求高是普遍挑戰(zhàn)，而 Jess 系統(tǒng)恰好針對性解決了這些痛點。隨著納米醫(yī)學(xué)、血管靶向療法等新興領(lǐng)域的發(fā)展，Jess 系統(tǒng)將持續(xù)為腦科學(xué)研究、疾病機制解析、創(chuàng)新療法驗證提供精準(zhǔn)可靠的技術(shù)支持，助力更多像 A??-POs 納米療法這樣的突破性成果落地，為 AD 等難治性疾病的治療帶來新希望。
* 本文轉(zhuǎn)載自「ProteinSimple」微信公眾號
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