在生物制藥研發(fā)與質(zhì)控領(lǐng)域，蛋白質(zhì)的精確分析是確保藥物安全性和有效性的關(guān)鍵步驟。傳統(tǒng) SDS-PAGE 凝膠電泳雖廣泛應(yīng)用，但其耗時(shí)費(fèi)力、重現(xiàn)性差等問題始終困擾著研發(fā)人員。如今，毛細(xì)管電泳-十二烷基硫酸鈉（CE-SDS）技術(shù)憑借高效、精準(zhǔn)、自動(dòng)化的優(yōu)勢(shì)，正在成為新一代蛋白質(zhì)分析的 “金標(biāo)準(zhǔn)"。

本文將通過分析單克隆抗體、病毒衣殼蛋白，對(duì)比Maurice™ 系統(tǒng) Turbo CE-SDS 與傳統(tǒng) SDS-PAGE 兩種方法的數(shù)據(jù)質(zhì)量、靈敏度及重現(xiàn)性，展示 Turbo CE-SDS 如何實(shí)現(xiàn)蛋白分析的“智能升級(jí)"！

01. 效率革新：Turbo CE-SDS讓蛋白分析實(shí)現(xiàn)高效自動(dòng)化

傳統(tǒng)SDS-PAGE需手動(dòng)制膠、染色、脫色，耗時(shí)長(zhǎng)達(dá)數(shù)小時(shí)，且產(chǎn)生大量有害廢液（圖1）。Maurice™ Turbo CE-SDS 通過全自動(dòng)工作流程，僅需65分鐘即可完成12個(gè)樣本分析，且廢液量大大減少，大幅提升實(shí)驗(yàn)室效率與環(huán)保性。

圖1 SDS-PAGE與CE-SDS工作流對(duì)比

02. 高靈敏度與精準(zhǔn)定：CE-SDS精準(zhǔn)解析蛋白雜質(zhì)與修飾

Maurice™ Turbo CE-SDS 的分辨率遠(yuǎn)超凝膠電泳，能夠檢測(cè)到 SDS-PAGE 無法分辨的微弱峰和次要修飾，提供更高的分離和定量精度。

以單抗藥物 Belimumab 為例，圖 2A 和 2B 分別展示了Belimumab使用 Maurice™ Turbo CE-SDS 方法在非還原和還原條件下生成的電泳圖譜，所顯示的峰對(duì)應(yīng)于凝膠電泳結(jié)果中的各種條帶。在非還原條件下，CE-SDS不僅清晰顯示主峰，還檢測(cè)到3個(gè)次要峰Peak1-Peak3（圖2A），而 SDS-PAGE 凝膠檢測(cè)不到（圖2C）。在還原條件下CE-SDS生成的電泳圖顯示出分辨良好的輕鏈（LC）和重鏈（HC），以及其他小峰。這些微量雜質(zhì)可能影響藥物穩(wěn)定性與療效，CE-SDS 為生物類似藥開發(fā)提供了關(guān)鍵的質(zhì)控依據(jù)。

圖2 非還原與還原條件下單抗 Belimumab 的CE-SDS 和 SDS-PAGE 分析結(jié)果

Maurice 的 CE-SDS 還可用于 AAV 病毒衣殼蛋白的定量分析。如圖3所示，CE-SDS 能夠清晰區(qū)分 AAV8 與 AAV9 的 VP1/VP2/VP3 組成，并檢測(cè)到低分子量（LMW）雜質(zhì)與修飾產(chǎn)物（如VP3a），為基因治療產(chǎn)品的質(zhì)量控制提供全面支持。

圖3  AAV8 與 AAV9 的 CE-SDS 電泳圖

03. 零學(xué)習(xí)成本：Compass 軟件讓數(shù)據(jù)解讀無縫銜接

Compass for iCE 軟件的 Lane View 功能可以將實(shí)驗(yàn)得到的電泳圖譜以類似傳統(tǒng)凝膠圖的形式展示出來，無縫銜接傳統(tǒng)數(shù)據(jù)解讀習(xí)慣，使得數(shù)據(jù)分析更加直觀易懂，且與傳統(tǒng)電泳結(jié)果直接對(duì)標(biāo)。

圖4 AAV 樣品的 Compass for iC 產(chǎn)生的凝膠圖（左）與SDS-PAGE凝膠（右）

04. 重現(xiàn)性：CE-SDS突破傳統(tǒng)電泳的批次變異瓶頸

Turbo CE-SDS 通過定量峰積分取代定性條帶強(qiáng)度評(píng)估，顯著降低了實(shí)驗(yàn)間的變異性。

通過對(duì)比 Belimumab 在 Maurice™ Turbo CE-SDS 連續(xù) 34 次進(jìn)樣與 SDS-PAGE 12 條泳道的數(shù)據(jù)，發(fā)現(xiàn)非還原條件下，CE-SDS 的總峰面積相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（%RSD）僅為1.04%，而 SDS-PAGE 高達(dá)23.56%（圖5）。還原條件下，Turbo CE-SDS 的 LC 和 HC 的峰面積百分比的%RSD也遠(yuǎn)低于 SDS-PAG（圖6），表明 CE-SDS 具有更高的定量重現(xiàn)性。同樣在 AAV8 與 AAV9 的樣本分析中也證明了這一點(diǎn)。

圖5 Belimumab 的 Maurice Turbo CE-SDS 和 SDS-PAGE 總峰面積重現(xiàn)性的比較（非還原條件下）

圖6 單抗 Belimumab 的 Maurice Turbo CE-SDS 和 SDS-PAGE 的峰面積百分比重現(xiàn)性的比較（還原條件下）

05. 還在固守 SDS-PAGE？—— 技術(shù)革新正當(dāng)時(shí)

將Maurice™ Turbo CE-SDS與SDS-PAGE 同步用于單克隆抗體和 AAV 樣本分析，數(shù)據(jù)已經(jīng)證實(shí) CE-SDS 以更快速度、更高精度和更強(qiáng)重現(xiàn)性實(shí)現(xiàn)蛋白分析新突破！

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